中國微生物菌種查詢網培養(yǎng)細胞時,傳統的觀點認為血清中的補體等會影響細胞生長,所以要滅活。但事實上,培養(yǎng)細胞時用的血清真的必須進行熱滅活嗎。其實不然,新的觀點認為,只有對補體敏感的細胞才需要熱滅清。
的補體參具有溶細胞活性,刺激平滑肌的收縮,細肥大胞和血小板釋放組胺,淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化,增強吞噬作用。在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅清。
實驗顯示,對大多數的細胞培養(yǎng)而言,所用的血清是不需要熱滅活的。經此熱滅活的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,從而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
如果必須做血清的熱滅活,應遵循56℃、30分鐘的原則,熱滅活過程中隨時搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。