甲苯胺藍(lán)染色觀察尼氏體呈深藍(lán)色-上海鄭核
一、實(shí)驗(yàn)器材及試劑
1、實(shí)驗(yàn)器材
名稱(chēng) 廠家 型號(hào)
脫水機(jī) 武漢俊杰電子有限公司 JJ-12J
包埋機(jī) 武漢俊杰電子有限公司 JB-P5
病理切片機(jī) 上海徠卡儀器有限公司 RM2016
凍臺(tái) 武漢俊杰電子有限公司 JB-L5
組織攤片機(jī) 浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司 KD-P
烤箱 天津市萊玻瑞儀器設(shè)備有限公司 GFL-230
載玻片 Servicebio
正置光學(xué)顯微鏡 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系統(tǒng) 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要實(shí)驗(yàn)試劑
試劑名稱(chēng) 廠家 貨號(hào)
二甲苯 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 10023418
甲苯胺藍(lán)染液 Servicebio G1032
冰醋酸 Servicebio G10000218
中性樹(shù)膠 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 10004160
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min-無(wú)水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來(lái)水洗。
2、甲苯胺藍(lán)染色:
植物組織切片入染液約2-5min后水洗,鏡檢,根據(jù)組織著色深淺進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆只蛘卟环只?,自?lái)水洗后,將切片置于烤箱內(nèi)烤干。
動(dòng)物組織切片入染液5min,水洗,1%的冰醋酸稍分化,自來(lái)水洗終止反應(yīng),顯微鏡下
控制分化程度,自來(lái)水洗后,將切片置于烤箱烤干。
3、透明封片:切片入干凈的二甲苯透明5min,中性樹(shù)膠封片。
4、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
三、結(jié)果判讀:
植物組織:木質(zhì)化細(xì)胞壁呈藍(lán)綠色,纖維素細(xì)胞壁呈紫藍(lán)色;
動(dòng)物組織:腦組織尼氏體呈深藍(lán)色,背景淡藍(lán)色;骨組織軟骨呈紫藍(lán)色,背景淺藍(lán)色;腸組織肥大細(xì)胞呈紫紅色,細(xì)胞核呈淺藍(lán)色,背景淺藍(lán)色。
四、注意事項(xiàng):
1、染完后的切片不能長(zhǎng)時(shí)間放在水里,會(huì)褪色。
2、組織一定要完全烤干后再封片,避免組織殘留小水珠。
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