化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定（CLIA），是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的一類免疫測(cè)定方法。吖啶酯是較為理想的發(fā)光底物，在堿性環(huán)境中即可被過氧化氫氧化而發(fā)光。它是目前發(fā)展和推廣應(yīng)用快的免疫分析方法，也是目前的標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)，靈敏度和度比酶免法、熒光法高幾個(gè)數(shù)量級(jí)，可以完全替代放射免疫分析、徹底淘汰酶聯(lián)免疫分析。主要具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、試劑價(jià)格低廉、試劑穩(wěn)定且有效期（6-18個(gè)月）、方法穩(wěn)定快速、檢測(cè)范圍寬、操作簡(jiǎn)單自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。

用作標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光劑應(yīng)符合條件：

1、能參與化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。

2、與抗原或抗體偶聯(lián)后能形成穩(wěn)定的結(jié)合物試劑。

3、偶聯(lián)后仍保留高的量子效應(yīng)和反應(yīng)動(dòng)力。

4、應(yīng)不改變或極少改變被標(biāo)記物的理化特性，特別是免疫活性。

魯米諾類和吖啶酯類發(fā)光劑等均是常用的標(biāo)記發(fā)光劑。

化學(xué)發(fā)光免疫分析中所使用的標(biāo)志物分類：

1、直接化學(xué)發(fā)光劑，直接用化學(xué)發(fā)光劑標(biāo)記抗原或抗體。

吖啶酯是目前常用的直接標(biāo)記發(fā)光劑。

吖啶酯在堿性條件下被H2O2氧化時(shí)，發(fā)出波長(zhǎng)為470nm的光，具有很高的發(fā)光效率，其激發(fā)態(tài)產(chǎn)物N-甲基吖啶酮是該發(fā)光反應(yīng)體系的發(fā)光體。吖啶酯類發(fā)光劑可直接用于標(biāo)記半抗原和蛋白質(zhì)等。用于標(biāo)記抗體時(shí)，結(jié)合穩(wěn)定，結(jié)合后并不減少光量子的產(chǎn)生，可獲得高的比活性，有利于雙位點(diǎn)化學(xué)發(fā)光免疫分析的建立。

2、酶促反應(yīng)發(fā)光劑利用標(biāo)記酶（辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶）的催化作用，使發(fā)光劑（底物）發(fā)光。

辣根過氧化物酶催化的發(fā)光劑為魯米諾及其衍生物。

魯米諾及其衍生物 魯米諾、異魯米諾及其衍生物都有化學(xué)發(fā)光特性。魯米諾是早合成的發(fā)光物質(zhì)。

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