戴文工程設計(上海)有限公司,1988年成立于中國上海,公司擁有建筑工程設計綜合甲級資質、機電施工三級資質、建筑裝飾裝修施工二級資質、環(huán)保工程三級資質、空氣凈化工程二級資質、電子與智能化工程二級資質,嚴格遵循IS09001國際質量標準體系進行內(nèi)部管理,順利通過了50430工程項目施工質量管理體系,28001職業(yè)健康管理體系認證、24001環(huán)境管理體系認證,樹立了良好的企業(yè)形象。戴文凈化工程事業(yè)部為戴文國際旗下一專業(yè)分支機構,專業(yè)從事于實驗室/潔凈工程EPC項目,專注于生物制藥、檢驗檢疫、科研教育、食品等行業(yè)領域的實驗室、凈化工程的系統(tǒng)集成。
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1、細胞培養(yǎng)實驗室的設置及設備
(一)環(huán)境要求
組織細胞培養(yǎng)技術與其他一般實驗室工作的主要區(qū)別在于要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。要求工作環(huán)境清潔,空氣清新,干燥和無煙塵。
(二)面積與預算
實驗室總面積96m3左右,大約耗資40萬(不含特殊先進設備)。
(三)細胞培養(yǎng)實驗室的布局
細胞培養(yǎng)實驗室布局大致為:無菌操作區(qū)、孵育區(qū)、制備區(qū)、清洗區(qū)、處理區(qū)、儲藏區(qū)。
1.無菌操作區(qū)
(1)無菌操作室:無菌操作區(qū)只限于細胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域,能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。
無菌操作間的空氣:紫外線燈,空氣過濾的恒溫恒濕裝置。
(2)超凈工作臺:操作簡單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。
超凈工作臺工作原理(大致相同)—-通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱,再經(jīng)空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。
2.孵育區(qū)
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴格,但仍需清潔無塵,因此也應設置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行,后者費用高,一般實驗室多采用孵箱進行工作。
3.制備區(qū)
在該區(qū)主要進行培養(yǎng)液及有關培養(yǎng)用的液體等的制備。
4.儲藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無塵。
5.清洗和區(qū)
清潔和區(qū)應與其他區(qū)域分開,主要進行所有細胞培養(yǎng)器皿的清洗、準備、及三蒸水制備等工作。
(四)細胞培養(yǎng)實驗室的設備
1. 常用的基本設備
(1) 儀器:
a)顯微鏡:倒置顯微鏡——是組織細胞培養(yǎng)室所必需的日常工作常規(guī)使用設備之一,便于掌握細胞的生長情況并觀察有無污染等。
b) 培養(yǎng)箱:體外培養(yǎng)的細胞和體內(nèi)細胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,大多數(shù)情況下,適溫度是37℃,溫差變化一般不應超過±0.5℃。
恒溫培養(yǎng)箱——應選隔水式或晶體管自控溫培養(yǎng)箱,此類培養(yǎng)箱靈敏度高,溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜。
CO2培養(yǎng)箱——目前多數(shù)的細胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點是能夠提供進行細胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%),易于使培養(yǎng)液的pH保持穩(wěn)定,適用于開放或半開放培養(yǎng)。
c)干燥箱:用于細胞培養(yǎng)箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱。干熱時,電熱干燥箱升溫較高,一般需達到160℃以上。通常使用鼓風式電熱干燥箱。
d)水純化裝置:細胞培養(yǎng)對水的質量要求較高,細胞培養(yǎng)以及與細胞培養(yǎng)工作相關的液體的配制用水必須事先嚴格純化處理。水純化時可采用離子交換裝置或蒸餾器。
e)冰箱:細胞培養(yǎng)室必須配備
○a普通冰箱或冷藏柜
——儲存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hank’s液試劑等培養(yǎng)用的物品及短期保存組織標本。
○b低溫冰箱(-20℃)、超低溫冰箱
——用于儲存需要冷凍保存生物活性及較長時期存放的制劑,如酶、血清等。
——細胞培養(yǎng)室的冰箱應屬專用,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質,且應保持清潔。
f)細胞冷凍儲存器:儲存器常用的是液氮容器。根據(jù)使用需要分為不同的類型及多種規(guī)格。選擇購置液氮容器時要綜合考慮容積大小,取放使用方便及液氮揮發(fā)量(經(jīng)濟)三種因素。
g)離心機:進行細胞培養(yǎng)時,常規(guī)需要進行制備細胞懸液、調整細胞密度、洗滌、收集細胞等工作,通常需要使用離心機。
h)天平:常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平。
i)器:直接或間接與細胞接觸的物品均需處理。
常用:高壓蒸汽鍋,手提式高壓蒸汽器
j)濾器:常使用的濾器有Zeiss濾器、玻璃濾器和微孔濾器
(2)培養(yǎng)用器皿:
培養(yǎng)瓶:由玻璃或塑料制成。主要用于培養(yǎng)、繁殖細胞。進行培養(yǎng)時培養(yǎng)瓶瓶口加蓋螺旋瓶蓋或膠塞,膠塞多用于密封培養(yǎng)。
培養(yǎng)皿:由玻璃或塑料制成,供盛取、分離、處理組織或做細胞毒性、集落形成、單細胞分離、同位素摻入、細胞繁殖等實驗使用。
多孔培養(yǎng)板:為塑料制品??晒┘毎寺〖凹毎拘缘雀鞣N檢測實驗使用。其優(yōu)點是節(jié)約樣本及試劑,可同時測試大量樣本,易于進行無菌操作。
c)其他用品:尚有收集細胞用的離心管,放置試劑或臨時插置吸管用的試管,裝放吸管以便的玻璃或不銹鋼容器,用于存放小件培養(yǎng)物品便于高壓的鋁制飯盒或貯槽,套于吸管頂部的橡膠吸頭,封閉各種瓶、管的膠塞、蓋子、凍存細胞用的安瓿或凍存管、不同規(guī)格的注射器、燒杯和量筒以及漏斗,超凈工作臺使用的酒精燈,供實驗人員操作前清潔手使用的盛有酒精或其他液的微型噴壺等。
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